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摘要:溶菌酶(英文缩写为Lys)广泛分布于自然界,具有杀菌作用的天然抗感染物质,有抗菌、止血、镇痛等功能,且对人体没有任何毒副作用,有很大的医学上价值,也可以做食品添加剂.2-巯基苯并咪唑(英文缩写为MBI)作为橡胶防老剂,是各种橡胶制作过程中的必要物质,其在环境中的残余物可进入人体,成为潜在的危害性,且其残余物进入机体后通常会与蛋白质生物大分子相互作用来表现其危害性.所以在分子水平研究MBI对Lys的毒性作用,对于阐明的MBI与Lys作用机理以及评价MBI的毒性具有重要意义.
本研究的目的是通过荧光光谱技术、紫外-可见吸收光谱技术、酶活力的测定方法、分子对接技术等,研究生理条件下Lys与MBI的之间相互作用.实验结果表明MBI与Lys之间的猝灭方式为静态猝灭,二者之间有一个结合位点,主要是通过氢键或者范德华力形成MBI-Lys的复合结构.MBI的结合可导致Lys的构象和一些微环境的变化.此外,分子对接技术的结果表明,MBI可以结合到Lys上并且与关键活性位点残基Gln 57和Asp 52相互作用形成两条氢键,导致Lys活性的竞争性抑制.在分子水平采用光谱方法、分子对接技术、酶活性测定相结合,研究2-巯基苯并咪唑与溶菌酶作用机理,建立其作用模型,利用分子对接技术和光谱学技术相结合,分析出Lys活性降低的真实原因,是本研究的最大创新点.
关键词:溶菌酶;2-巯基苯并咪唑;荧光;酶活性