更新时间:03-27 (回忆总想哭)提供原创文章
摘要:随着我国社会渐趋老龄化,糖尿病发病率也逐年升高。而作为辅助治疗糖尿病的主要药物,α-糖苷酶抑制剂有着能有效降低餐后血糖的作用。目前,人们在近百种天然物中发现了具有抑制α-糖苷酶活性的成分,然而现有的筛选糖苷酶抑制剂的体系仍有缺陷。
本文主要研究了葡萄糖微孔板法和PNPG微孔板法两种快速筛选体系,通过单因素实验和正交实验,优化了两种筛选体系的反应条件,比较了两种体系的优劣,并分别用两个体系对从7种不同的原料中的乙醇提取物进行筛选。结果显示,葡萄糖微孔板法的最适反应条件是蔗糖底物浓度0.25g/L,反应温度40℃,反应时间25min。PNPG微孔板法在底物浓度为0.25mmol/L,反应温度40℃,反应时间25min的条件下酶活最高。最后验证得到牛蒡皮和牛蒡肉的乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用较大。
关键词 葡萄糖微孔板法;PNPG微孔板法;筛选体系
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 糖尿病概述-1
1.1.1 糖尿病的概念-1
1.1.2 糖尿病的诊断标准-1
1.1.3 糖尿病的类型-1
1.2 糖尿病的药物治疗及研究进展-1
1.2.1 胰岛素-1
1.2.2 口服降血糖药-2
1.2.3 中草药药物-2
1.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂概述-2
1.3.1 α-葡萄糖苷酶-2
1.3.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂的来源-2
1.3.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂的作用机制-3
1.4 α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的研究进展-3
1.4.1 酶-抑制剂模型(体外筛选模型)-4
1.4.2 高血糖动物模型(体内筛选模型)-4
1.4.3 其他筛选模型-5
1.5 本课题的研究意义及主要内容-5
1.5.1 研究意义-5
1.5.2 研究的主要内容-5
2 材料与方法-6
2.1 材料-6
2.1.1 原料-6
2.1.2 试剂-6
2.1.3 仪器-6
2.2 方法-6
2.2.1 小鼠制备空肠匀浆(含α-葡萄糖苷酶)-7
2.2.2 各原料活性部位的提取-7
2.2.3 葡萄糖微孔板法快速筛选平台体系优化-7
2.2.4 PNPG微孔板法快速筛选平台体系优化-8
3 结果与分析-10
3.1 葡萄糖微孔板法快速筛选平台体系-10
3.1.1 葡萄糖标准曲线-10
3.1.2 单因素实验-10
3.1.3 葡萄糖微孔板法正交试验-12
3.1.4 葡萄糖微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的验证-12
3.1.5 葡萄糖微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的应用-13
3.2 PNPG微孔板法快速筛选平台体系-13
3.2.1 PNP标准曲线-13
3.2.2 单因素实验-13
3.2.3 PNPG微孔板法正交试验-15
3.2.4 PNPG微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的验证-16
3.2.5 PNPG微孔板法快速筛选α-糖苷酶抑制剂的应用-16
结论-17
致谢-18
参考文献-19