更新时间：03-27 （回忆总想哭）提供原创文章
摘要:本研究首先从底物浓度、酶的用量、酶反应时间、抑制剂溶剂干扰共4个因素对PTP1B抑制剂的高通量快速筛选平台进行优化。其后，利用优化的筛选平台对6种醇提物样品进行初筛，筛选到2种抑制率大于70%的样品分别为银杏醇提物和山药醇提物。接着，将银杏醇提物浓缩液用水溶解后，再次分别用乙酸乙酯、石油醚、正丁醇三种有机物试剂进行萃取。得到乙酸乙酯相、石油醚相、正丁醇相、水相这四种不同极性的提取物，分别测这四种不同极性组分对PTP1B酶的抑制率，筛选出对PTP1B酶活抑制率最大的银杏正丁醇相，再将银杏正丁醇相稀释成不同浓度，根据其对PTP1B酶的抑制率，算出它的IC50值为44.373 µg/mL。
关键词 PTP1B；银杏；抑制剂
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 PTP-1
1.1.1 PTP定义-1
1.1.2 PTP家族-1
1.2 PTP1B抑制剂-1
1.2.1 PTP1B定义-1
1.2.2 PTP1B结构及定位-2
1.2.3 PTP1B与Ⅱ型糖尿病的关系-3
1.2.4 PTP1B抑制剂的相关化合物的研究进展-3
1.3 PTP1B抑制剂临床应用-4
1.3.1 2-草酰胺苯甲酸类-4
1.3.2 苯并呋喃类 （benzbromarone）-5
1.3.3 香草酸类衍生物-5
1.3.4 天然的PTP-1B抑制剂-5
1.4 银杏-5
1.4.1 银杏的概述-5
1.4.2 银杏的营养成分-5
1.4.3 银杏与糖尿病关系-6
1.5 研究目的与意义-6
2 材料与方法-7
2.1 实验材料-7
2.1.1 实验原料-7
2.1.2 实验试剂-7
2.1.3 实验仪器-7
2.2 实验方法-7
2.2.1 银杏醇提与有机试剂萃取-7
2.2.2 对硝基苯酚标准曲线的制作-8
2.2.3 PTP1B活力测定及高通量筛选模型的优化-8
2.2.4 银杏中抑制PTP1B活性部位的筛选-8
2.2.5 抑制率的测定-9
2.2.6 抑制类型的测定-9
3 结果与分析-10
3.1 对硝基苯酚标准曲线-10
3.2 p-NPP浓度曲线-11
3.3 确定酶的最适用量及酶反应平衡时间-12
3.4 DMSO对酶活的影响-13
3.5 钒酸钠不同浓度梯度的抑制率的IC50值-14
3.6 醇提物的筛选-15
3.7 银杏中不同极性部分的提取率-15
3.8 银杏不同极性萃取物的酶的抑制率-15
3.9 银杏正丁醇相不同浓度梯度抑制率的IC50值-16
结论-17
致谢-18
参考文献-19