更新时间:04-17 (杭州考生)提供原创文章
摘要:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是引起胃炎、消化道溃疡等胃肠疾病的主要原因。本文以幽门螺杆菌菌株裂解物作为抗原,刺激产蛋鸡,使之产生特异性抗体;免疫后,采集被免鸡的血,用酶联免疫法(ELISA)测定其血清中IgG的效价。免疫后收集鸡蛋,应用改进的硫酸铵沉淀法提纯蛋黄中的卵黄抗体。用聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE法测定提取出的卵黄抗体。用薄层扫描分析测定各个纯化阶段中样品的纯度,纯度达到80%。再测定纯化后卵黄抗体的效价,测得纯化后的抗HP-IgY效价滴度达到52000。同时对IgY稳定性进行检测,确定了抗体在不同温度及不同pH等环境因素影响下的活性范围,对应用IgY进行抗体治疗相关疾病起到指导作用。
关键词 幽门螺杆菌;卵黄抗体;抗体效价;纯度;稳定性
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 概述-1
1.1.1 免疫球蛋白的研究进展-1
1.1.2 卵黄抗体的分子结构-1
1.1.3 卵黄抗体IgY的构成-1
1.1.4 IgY的应用研究-2
1.2 幽门螺杆菌的治疗现状及其研究进展-2
1.2.1 幽门螺杆菌及其治疗现状-2
1.2.2 IgY抗幽门螺杆菌的研究进展-3
1.3 本论文研究的主要内容与意义-3
1.3.1 研究内容-3
1.3.2 主要意义-3
2 材料与方法-4
2.1 材料-4
2.1.1 实验试剂-4
2.1.2 实验器材-5
2.1.3 试剂的配制-6
2.2 方法-7
2.2.1 卵黄抗体的制备-7
2.2.2 间接酶联免疫法(ELISA)测定效价-8
2.2.3 卵黄抗体纯度测定-9
2.2.4 卵黄抗体稳定性的测定-10
3 结果与分析-11
3.1 ELISA测定-11
3.1.1 血清中OD值-11
3.1.2 鸡血清的效价滴度-11
3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯度-12
3.2.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳图-12
3.2.2 纯化后IgY效价测定-13
3.2.3 纯化的IgY效价滴度-13
3.3 卵黄抗体稳定性检测-14
3.3.1 温度对IgY的影响-14
3.3.2 pH值对IgY的影响-15
结论-16
致谢-17
参考文献-18