更新时间：03-03 （lovefish）提供原创文章
摘要:氮素是导致水体污染的一类重要污染物。目前，由氮素污染引起的水体富营养化已成为世界性的环境问题。国内外对氮素污染的治理日益重视，生物脱氮技术因其迅速安全倍受青睐，反硝化细菌是生物脱氮技术关键载体之一，本课题就反硝化细菌的选育优化做了如下研究：
1、采用稀释平板涂布分离法从采集的土壤中筛选出3株反硝化细菌，通过16S rDNA鉴定出两株，分别为鲍曼氏不动杆菌（Acinetobacter baumannii），黄色海假单胞菌（Pseudomonas xanthomarina）。
2、以脱氮率为考核指标，比较3株细菌的反硝化能力，以鲍曼氏不动杆菌最佳，脱氮率达到78.5%。
3、以鲍曼氏不动杆菌为研究对象进行发酵条件的初步优化。通过单因素实验确定菌株生长最佳pH为5.0，最佳温度为30℃；经8因素2水平的PB实验，确定碳源丁二酸钠和氮源酵母粉是影响菌株生长的关键因素；进一步通过单因素实验逐一优化碳氮源最佳浓度，得最适发酵培养基为丁二酸钠8 g/L、酵母粉6 g/L、硝酸钠0.67 g/L、磷酸二氢钾1.36 g/L、硫酸铵0.24 g/L、硫酸镁0.2 g/L，培养条件为：pH 5.0，30℃，200 rpm。
4、最适培养条件下，鲍曼氏不动杆菌发酵液OD600达7.29，约3×108 cfu/ml，较优化前提高了217%，发酵周期为14h，72 h去氮率达92.5%。
关键词：反硝化细菌；筛选鉴定；发酵优化
目录
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论-1
1.1 水资源危机—氮素污染-1
1.1.1 氮素污染及其危害-1
1.1.2 生物脱氮治理氮素污染-2
1.2 国内外研究现状及应用前景-2
1.2.1反硝化细菌及其作用机理-2
1.2.2 反硝化细菌的选育研究-3
1.2.3 反硝化细菌应用前景-3
1.3 本课题立题依据及内容-4
第2章 材料与方法-5
2.1实验材料-5
2.1.1土壤来源-5
2.1.2 主要仪器-5
2.1.3 主要试剂与工具酶-5
2.1.4 培养基-6
2.2实验方法-6
2.2.1 菌株的筛选与鉴定-6
2.2.2脱氮能力测定-9
2.2.3 菌株发酵条件优化-12
第3章 结果与讨论-13
3.1菌株筛选及鉴定-13
3.1.1反硝化细菌筛选及初步鉴定-13
3.1.2形态学观察及16S rDNA鉴定-13
3.1.3 反硝化能力测定-16
3.2 发酵条件优化-16
3.2.1菌株生长曲线测定-16
3.2.2 初始pH对菌株生长的影响-17
3.2.3 温度对菌株生长的影响-17
3.2.4 培养基关键成分分析实验-18
3.2.5 碳氮源添加量对菌株生长的影响-19
3.2.6 优化后菌株生长曲线与去氮能力-20
第4章结论与展望-23
4.1结论-23
4.2 不足之处及未来展望-23
参考文献-25
致 谢-26