更新时间：01-09 （晓萱）提供原创文章
摘要:宏基因组文库技术是开发利用未培养的微生物基因资源的有效途径。
采用 6种方法从特定环境土壤中提取微生物总DNA构建了以pBluescript SK为载体的基因组文库 ,共获得5600个阳性克隆,文库DNA总容量约20MB ,平均插入片段长度为4.3kb 。微生物基因组文库的成功构建 ,对于以后研究微生物学和筛选有重要意义。
关键词：特定环境土壤,宏基因组文库;拮抗;筛选
目录
摘要
Abstract
引 言1
1土壤DNA提取方法的研究.2
1.1 材料与方法2
1.1.1 土壤样品2
1.1.2主要试剂及仪器2
1.1.2.1主要试剂2
1.1.2.2 主要仪器2
1.1.3.土壤DNA的提取方法2
1.1.3.1玻璃珠-PVPP-溶菌酶法2
1.1.3.2玻璃珠-PVPP-SDS法3
1.1.3.3玻璃珠-PVPP-冻融法3
1.1.3.4 CTAB-SDS-冻融法4
1.1.3.5 SDS-酚氯仿抽提法4
1.1.3.6 ZR Soil Microbe DNA MiniPrep试剂盒法4
1.1.4土壤DNA的定量和纯度检测4
1.1.516SrDNA的PCR扩增5
1.2土壤DNA提取结果5
1.2.1土壤DNA的得率和纯度比较5
1.2.2琼脂糖凝胶电泳图及16Sr DNA PCR扩增电泳图6
1.3小结6
2土壤微生物宏基因组文库的构建.7
2.1材料与方法7
2.1.1实验材料试剂及仪器.7
2.1.2实验方法步骤.7
2.2实验结果与小结.9
3拮抗克隆子的初步筛选.10
3.1材料与方法.10
3.1.1实验材料.10
3.1.2培养基10
3.1.3 实验仪器.10
3.1.4实验方法步骤.11
3.2实验结果.11
结 论.15
致 谢.16
参考文献.17